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1检查:右手握镜臂,从镜箱内取出显微镜,左手托镜座,轻轻放在实验桌上。先检查一下显微镜各部件有无损坏,如发现有损坏或性能不良者,立即报告教师请求处理。2准备:将显微镜放于前方略偏左侧,必要时使镜筒倾斜有的显微镜本身已经倾斜以便观察。转动粗调节钮,将镜筒略升高或将载物台下降使物镜与载物台距离略拉开。再旋转物镜转换器,将低倍镜对准载物台中央的通光孔可听到“咔哒”声。3对光:打开光圈,上升聚光器,双眼同时睁开,以左眼向目镜内观察,同时调节反光镜的方向,直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其他景物映入视野,一般用凹面镜对光。4放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,标本片的盖片朝上,将标本片放到载物台前方,然后推到物镜下面,用压片夹压住,如有标本移动器,可用上面的弹簧夹夹住标本片,然后把要观察的部分移到通光孔的正中央。5调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,从显微镜侧面注视物镜镜头,同时旋转粗调节钮,使镜筒缓慢下降或镜台上升,大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时,再用左眼从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调节钮,使镜筒缓缓上升,直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰,可转动细调节钮,使物像更加清晰。如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离>5.40mm而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台。如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成:①转动调节钮太快,超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距.②物镜没有对正,应对正后再观察。③标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象。④光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时,易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。2.高倍镜的使用方法1选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。2转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察防止高倍镜头碰撞玻片,如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。3调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈,即可获得清晰的物象切勿用粗调节器!如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针切勿转错方向转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造成:①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后,移到视野中央,再换高倍镜观察。②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述步骤操作。③焦距没调好,应仔细调节焦距。有的显微镜高倍镜与低倍镜不配套,从低倍镜转换高倍镜时,往往转不过来或撞坏标本,如遇到这种情况,可把镜筒略升高或载物台下降,直接用高倍镜调焦。方法是:从侧面注视物镜,调节粗调节钮,使高倍镜头下降至与标本片最短距离,再观察目镜视野,慢慢调节细调节钮,使镜头缓缓上升,直至物像清晰为止。如需要更换标本片时,应该先把镜筒升高或载物台下降,然后把标本片移到载物台前方,再取下。3.油镜的使用应先调低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下:1先用低干燥系物镜观察标本的概况。2更换高倍干燥系物镜,把所要观察的部分移到视野中央。3把镜筒上升约1.5厘米,再把油镜转到工作位置4在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油或石蜡油。当使用N.A.>1.0的浸没系物镜或暗视野斜照明时,在聚光器上也要滴油一般省去在聚光器上滴油这一步骤。5细心拧动粗调焦螺旋,使镜筒慢慢下降。这时要仔细观察物镜前端与标本之间的距离,先使物镜前端与油滴接触,然后再慢慢下降镜筒,至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜油镜的工作距离约0.2mm。6眼睛要看目镜中,拧动细调焦螺旋,使镜筒慢慢上升到能看清标本。这步操作要特别注意不要把细调焦螺旋的方向拧错,以防压碎标本。7看清标本后,取下目镜,直接向镜筒中看,把聚光器下的可变光澜关到最小,再慢慢开大,开到它的口径与视场的直径恰好一样大,即使聚光器的镜口率与物镜的镜口率相配合。如果聚光器的镜口率小于物镜的镜口率,则物镜的镜口率就不能充分发挥。8观察完毕后,提升镜筒约1厘米,把油镜转离光轴,及时作清洁工作。先用干的擦镜纸擦一、二次,把大部分油去掉,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后再用干擦镜纸擦一次。擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦。擦拭要细心,动作要轻,不可用力擦。如果聚光器上有滴油也要同样清洁。载波片上的油可用“拉纸法”擦净,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作3—4次,即可干净。如果是使用石蜡油,清洁时纸用擦镜纸不必沾二甲苯,等到实验一个阶段后,再用二甲苯擦拭。9把聚光器下降约1厘米,把载物台上的标本移动架移到适当位